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dynamic BIOSENSORS heliX cyto 全自动实验室分析系统

dynamic-BIOSENSORS-heliX-cyto全自动实验室分析系统产品

规格

  • 产品名称: 螺旋细胞
  • 制造商: 动态生物传感器有限公司
  • 版本: 1.0

产品信息

  • heliX cyto 系统专为单细胞相互作用细胞术 (scIC) 设计,以时间分辨的方式测量荧光标记分子与细胞表面靶标的结合动力学。

产品使用说明

使用 heliXcyto 芯片

  • heliXcyto 芯片包含一个带有电极点的微流体通道,用于细胞捕获和测量。确保芯片放置正确,并遵循捕获细胞的说明。

维护芯片

  • 维护芯片仅用于清洁、测试和维护操作。避免将其用于实验,以防止污染。

运行缓冲液

  • 测量时请使用电泳缓冲液 1 (RB 1)。详细信息请参阅主指南中的 scIC 兼容性表。

传感图分析

  • 在测量过程中,使用 heliOS 软件实时监控传感器图。分析荧光响应随时间的变化,以提取动力学速率。

钝化

  • 考虑使用钝化作为可选步骤,通过在芯片上孵育钝化试剂来防止分析物吸附。

正常化

  • 归一化是将数据标准化以便进行比较和分析的过程。请按照用户手册中的归一化步骤进行操作。

介绍

heliXcyto 术语 单细胞相互作用 细胞计数法

  • 单细胞相互作用流式细胞术 (scIC) 是一种通过以时间分辨的方式记录荧光信号来测量荧光标记分子(分析物)与细胞表面目标(配体)的结合动力学的技术。

分析物

  • 分析物是流动相中的荧光标记分子,可以与细胞表面的目标结合。

配体

  • “配体”是 heliOS 软件中用来描述分析物能够结合的细胞表面靶点的名称。配体可以是受体分子、脂质、糖或其他细胞表面分子。

细胞陷阱

  • 细胞陷阱是安装在 heliXcyto 芯片上的可渗透、生物相容性的聚合物笼状结构。它们旨在捕获并固定流道中约 6 至 25 µm 大小的细胞。细胞陷阱有三种不同尺寸:小号、中号和大号。

heliXcyto芯片

  • heliXcyto 芯片包含一个微流体通道,两侧各有一个开口。两个金色电极点位于通道中间。
  • 其中一个点作为参考点,另一个点带有用于细胞捕获的3D生物相容性聚合物笼,并作为测量点。测量点可以包含1个或5个相同类型的捕获器。
  • 参考点可实时参考收集到的荧光信号。heliXcyto 芯片可重复使用,也可一次性使用。dynamic-BIOSENSORS-heliX-cyto全自动实验室分析系统FIG-1 dynamic-BIOSENSORS-heliX-cyto全自动实验室分析系统FIG-2

维护芯片

  • 维护芯片是一种单通道微流体芯片,用于所有清洁、测试和维护操作。
  • 这些操作包括清洁和睡眠程序、唤醒和预处理程序、系统清洗以及流体测试。此芯片不应用于细胞/蛋白质溶液的实际实验,以防止芯片进一步污染。

运行缓冲液

  • 运行缓冲液是 heliXcyto 检测过程中使用的缓冲液。通常建议使用运行缓冲液 1 (RB 1)。
  • 请参阅主指南中的 scIC 兼容性表以了解更多信息。

传感图

  • scIC 传感图是荧光响应(以每秒计数 (cps) 为单位)随时间变化的曲线,用于说明细胞表面或细胞内相互作用的进展。该曲线可以 view在测量过程中在 heliOS 中实时编辑。
  • 在分析传感图时,确定与观察到的荧光痕迹最相符的指数,并提取动力学速率(kon、koff)。dynamic-BIOSENSORS-heliX-cyto全自动实验室分析系统FIG-3

钝化

  • 钝化是运行过程中的一个可选步骤,将钝化剂注入芯片并孵育以封闭芯片表面。这有助于防止分析物吸附到芯片材料上。

正常化

  • 采用归一化步骤来解释由于每个测量点的信号由单独的检测器收集而导致的细微信号差异。在分析开始时,注入特定浓度(基于最高分析物浓度和分析物标记程度)的荧光染料。此归一化步骤自动包含在测量方法中,并在实时参考之前,使用测得的归一化峰在数据分析过程中自动校正检测器之间的差异。

scIC测量原理

scIC 应用

  • 单细胞相互作用流式细胞术 (scIC) 测量荧光标记分析物直接在活细胞上与目标结合和解离的动力学速率和亲和力。
  • scIC 中的分析物检测与尺寸无关,因此与从亚纳米到 > 100 纳米的任何分子相关,并且与从小分子、肽、适体、纳米抗体、亲和体、抗体、双特异性抗体形式、蛋白质、蛋白质复合物、直至囊泡(外泌体)、脂质纳米颗粒和病毒的所有分子类别相关。

scIC技术可以解决以下应用领域:

  • 信号测量 amp结合筛选中的条件
  • kon 和 koff 速率的动力学分析
  • 通过 koff 和双相拟合模型评估亲和力和亲和力
  • 特异性测试
  • 细胞表面膜蛋白的相对定量
  • 表位分类和竞争研究
  • 抑制试验
  • 目标蛋白质内化的评估

heliXcyto 硬件功能

流体系统

  • heliXcyto 的流体系统最多可容纳 3 个不同的缓冲液瓶,从而能够提供多种运行和维护缓冲液。heliXcyto 中的泵可将流速设置为 20 至 500 µL/min,以满足不同的需求。ample 和分析要求。芯片的流道通过两个开口连接到流体系统。左侧开口连接到ample、缓冲液和洗涤管线,而右侧开口与再生管线相连。
  • 这种双向流体系统能够在运行测量的不同步骤时实现稳定的细胞捕获,并最终实现芯片再生,以实现分析中芯片的可重复使用。dynamic-BIOSENSORS-heliX-cyto全自动实验室分析系统FIG-4
  • 图 1. 流体系统中的芯片集成

光学系统

  • 荧光信号由红色和绿色发光二极管 (LED) 激发,并由四个单光子计数器检测,这些计数器收集整个通道深度内每个点的红色和绿色信号。
  • 可以在同一测量点同时监测两个独立信号,从而可以在双色分析设置中同时测量两种相互作用。dynamic-BIOSENSORS-heliX-cyto全自动实验室分析系统FIG-5
  • 图 2. 光学设置
  • 每个测量点的信号采集均由单独的检测器处理,这可能会导致原始计数略有差异。为了解决这个问题,数据生成分析中会自动包含一个标准化步骤。
  • 除了单光子计数器外,该仪器还配备了CCD相机和反射光显微镜。这些工具可以实时进行细胞成像,从而能够在整个测量过程中评估细胞完整性和分析物的质量。
  • 这种组合设置确保了相互作用和生物条件的跟踪,从而对实验进行了全面的评估。

scIC 工作流程

scIC 测量过程可分为 3 个关键步骤

  1. heliOS 中的实验设计: 每次测量都始于在 heliOS 软件中设计实验。通过选择预定义的方法并调整实验参数(例如所用的细胞系、分析物浓度和缓冲液条件)来设置检测工作流程。heliOS 会自动计算测量所需的细胞、分析物、缓冲液和其他溶液的精确用量,从而简化准备过程。
  2. 缓冲液、分析物和细胞的制备: 实验设计完成后,根据 heliOS 提供的规范准备所需材料。缓冲液、分析物和细胞被装入仪器自动进样器。amp勒。
  3. 测量和数据分析: 系统会按计划执行一系列自动化实时交互测量,无需用户进一步干预。测量过程中即可进行数据分析,从而立即获得结果洞察。

heliOS 中的 scIC 检测

除了数据生成分析之外,该软件还提供芯片测试、清洁和仪器维护的方法。

表 1. 已验证的数据生成分析

scIC动力学 测量细胞的完整动力学,分析物结合可在 1 至 5 个浓度之间调节,然后在最高浓度后进行一次解离。

绿色或红色通道。包含仅分析物测试的选项。

scIC 动力学 – 双色 测量细胞的完整动力学,分析物结合浓度可在1至5个浓度之间调节,在最高浓度后进行单次解离。绿色和红色通道同时启用。包含仅分析物测试的选项。
scIC 解离 – 双色 测量已用绿色和/或红色通道的荧光标记分析物预孵育的细胞中分析物的解离。

scIC 测量的准备和分析开发

在设置 scIC 测量之前,需要考虑以下几点

  • 分析物浓度、标记程度、特性和质量。
  • 归一化溶液和激发功率。
  • 细胞质量和处理。

分析物浓度和标记程度

  • 根据标准动力学测量实践,对于多浓度动力学,我们建议选择分析物摩尔浓度范围为预期平衡解离常数 (Kd) 的 0.1 倍至 10 倍。对于单浓度动力学或解离测量,分析物浓度应为预期 Kd 的 1 倍至 10 倍。以 25 µL/min 的流速计算,10 分钟的结合时间所需的分析物体积总计约为 300 µL。
  • 分析物的标记度 (DOL) 理想情况下应为 1,但 2 或 3 的 DOL 值也可以接受。但请注意,分析物上的标记数量过多可能会影响其结合特性,并可能增加聚集或非特异性结合的可能性。为了获得最佳 DOL,请遵循 heliXcyto 试剂系列中含有红色或绿色染料的标记试剂盒随附的方案。
    正常化
  • 归一化是所有数据生成方法的第一步。它可以补偿因每个测量点使用单独检测器而导致的细微信号变化。在此步骤中,在检测开始时注入用户自定义浓度的荧光染料。
  • 标准化溶液的浓度通过将测量中使用的最高荧光标记分析物浓度乘以分析物的标记度 (DOL) 来计算。该浓度将决定测量过程中施加的 LED 激发功率。目标是使标准化溶液峰达到大致相同的荧光信号。 amp度作为最高分析物浓度。
  • 请参阅主指南中的标准化溶液浓度图表来设置初始值。请注意,该图表仅供参考初始设置,但 LED 激发功率可在实验开发过程中进一步调整。

细胞质量和制备

  • 细胞活力应高于95%,且细胞状态通常良好。对于贴壁细胞,我们建议使用汇合度为50-70%的细胞。
  • 对于悬浮细胞,我们建议在生长的对数中期收获。每次运行需要 50 µl 1E+06 个细胞/mL 的细胞悬浮液。

悬浮细胞收获

  1. 将约 2E+06 个细胞以 300 g 离心 7 分钟,以去除细胞培养基。弃去上清液。
  2. 将细胞沉淀重悬于约 1 mL DPBS 中,清洗一次。400 g 离心 5 分钟,使活细胞沉淀。小心弃去上清液,去除碎片和培养基。
  3. 轻轻地重新悬浮在 1 mL DPBS 中,将悬浮液转移到细胞过滤器的顶部,并通过重力流过滤悬浮液。
  4. 测量过滤悬浮液的细胞浓度并调整至 1E+06 个细胞/mL。
    • 提示: 一些悬浮细胞容易形成团块。轻轻地重新悬浮团块,并在第一次离心前进行过滤。
    • 处理细胞悬浮液时使用宽口径移液器吸头,以避免在转移或重新悬浮过程中产生高剪切力。

贴壁细胞收获

  1. 用无菌 DPBS 清洗细胞。
  2. 使用您喜欢的解离试剂(例如 TrypLE)将细胞从培养瓶中解离出来。
  3. 将解离的细胞重新悬浮到优选体积的培养基中,并用 30 nm 细胞过滤器过滤。
  4. 或者,对于强粘附细胞,添加 EDTA(最终浓度为 5 mM)。
  5. 300 g 离心 7 分钟,去除细胞培养基。弃上清液。
  6. 将细胞重新悬浮于 1 mL DPBS 中。
  7. 测量细胞浓度并调整至 1E+06 细胞/mL。
    • 提示: 用 DPBS 1:4 稀释的细胞培养基可用于向细胞中添加营养物质amp对于敏感细胞或较长的检测工作流程,则需要较少的资源。

细胞固定

  1. 以 300 g 离心 7 分钟,直至细胞数量达到 10E+06,以去除细胞培养基。弃上清液。
  2. 将细胞沉淀重悬于 1 mL PBS 中,离心并弃去上清液。
  3. 将细胞沉淀重新悬浮于 500 μL PBS/2% PFA(62.5 μL 16% PFA 溶液 + 437.5 μL PBS)中。
  4. 在室温下孵育细胞 10 分钟(间歇轻轻摇晃)。
  5. 添加 500 μL PBS 并以 400 g 的速度离心悬浮液 5 分钟以去除 PFA。
  6. 丢弃上清液。
  7. 将细胞重新悬浮在 1 mL PBS 中,通过 30 µm 细胞过滤器过滤,离心(400 g,5 分钟)并丢弃上清液。
  8. 将细胞重新悬浮在约 1 mL PBS 中(可选:调整至最终浓度为 5E+06 个细胞/mL)。
  9. 将固定细胞储存在 2-8°C 下,一个月内使用。
    • 如果需要固定更多单元格,请相应地增加所有数量。
    • 笔记: 如果细胞敏感且通常使用较低的重力,则可以根据细胞类型调整细胞收获过程中的离心速度。
    • PFA 浓度可能在 0.5% 至 4% 之间变化。

scIC 检测设置

以下 scIC 检测应包含在检测开发中,并且可以在以后的检测工作流程中重复。

检测开发工作流程分为 3 个不同的连续步骤:

  1. 细胞芯片检测
  2. 仅分析物测试
  3. 动力学分析

细胞芯片检测

  • 在使用细胞芯片进行测量之前,需要评估新芯片的质量。首先单独运行细胞芯片测试。请参阅主指南中 Helix 细胞芯片章节,了解如何设置和评估芯片测试。

仅分析物测试

  • scIC 分析的开发始于仅分析物测试,该测试评估荧光标记分析物在没有细胞的新鲜芯片表面上的行为。
  • 该测试还可以定期重复,以评估标记分析物的稳定性。可以通过启用“单元格设置”下的“仅分析物”复选框,在动力学分析中配置 scIC 仅分析物测试。
  • 对于分析物质量评估,使用的最高浓度就足够了,并且可以通过禁用分析中除一个关联之外的所有关联来配置。

动力学分析工作流程设置

  • 动力学分析通常用于自动化工作流程,该工作流程包含数据生成分析和维护环节。一旦分析物通过了质量控制(仅限分析物)测试,即可用于细胞测量。
  • 为了可靠地量化动力学速率,结合过程中的信号响应应该是浓度依赖性的,随着分析物浓度的升高而增强。
  • 最高浓度应达到平台期,这表明结合已达到稳态。解离需要运行足够长的时间,以解离大部分结合分析物(超过5%),从而实现可靠的曲线拟合。
  • 使用分析条件中的默认参数作为起点,并根据结果进一步调整。

Example 1. 推荐的检测工作流程

分析工作流程允许用户根据其特定的实验需求对测量和维护方法进行排队。

检测工作流程可能包括按指示顺序的以下步骤:

  1. Prime(维护芯片)
  2. scIC 动力学(细胞 A、分析物 A、细胞芯片)
  3. 系统清洗(维护芯片)
  4. scIC 动力学(细胞 B、分析物 A、细胞芯片)
  5. 系统清洗(维护芯片)
  6. 分析物仅配置 scIC Kinetics(分析物 A,Cyto 芯片)
    • 预处理和系统清洗步骤在维护芯片上进行。切换到其他细胞系时以及在工作流程结束时进行仅分析物检测之前,都需要进行系统清洗。
    • 有关更多详细信息,请参阅主指南中有关 Cyto 系统清洗的部分。
    • 当对细胞进行动力学分析时,要考虑细胞活力,这取决于细胞系。
    • 对于敏感细胞系,建议每个检测流程仅运行 1-2 个检测。对于适应性更强的细胞系,可以排队进行更多检测。
    • 笔记: 对于额外的分析,通过不同的细胞名称在单独的小瓶中准备细胞溶液。
    • 确保所有试剂均为新鲜试剂,并经0.22 µm滤膜过滤。最后,按照heliOS的指示将配制好的试剂放入仪器中。
    • 单击蓝色箭头“运行”图标并按照分析开始向导中的步骤即可开始运行。
    • 一旦运行开始,设备就会独立运行,直到整个分析工作流程完成。

scIC实验分析

scIC分析工作流程

  • 由于 heliXcyto 芯片表面捕获的细胞上发生的事件的自然复杂性,scIC 数据可能与标准生物传感器数据不同,这可能导致传感器图不规则。
  • 因此,强调在每个测量步骤中捕获的图像以及在自动分析的登录页面中生成的传感器图的质量控制。
  • 此外,heliOS 还提供了工具来解决 scIC 手动数据分析期间的传感器图异常问题。

scIC数据分析流程:

  1. 图像检查:
    • 检查整个测量过程中捕获的所有图像(实验窗口中的图像选项卡)。
    • 在整个测量过程中,有多少细胞稳定地保持在陷阱中?
    • 细胞状态如何?检查粒度和细胞完整性。
    • 再生步骤后陷阱是否干净?
  2. 原始数据检查:
    • 检查参考点 1 和测量点 2 的原始数据
    • 归一化峰的信号应接近或高于最高原始数据信号。
    • 两个点上的信号是否都返回到基线水平,或者是否存在非特异性结合的证据?
  3. 规范化数据检查:
    • 点 1 和点 2 的注入跳跃是否正确重叠?
  4. 参考数据检查:
    • 再生步骤是否能使信号恢复到基线?如果没有,请检查再生后陷阱中是否有细胞或碎片。viewing 图像。
    • 参考曲线中是否存在尖峰、异常值或其他异常情况?如果有,请重新view 通过图像来识别潜在原因并考虑手动调整。
  5. 数据拟合检查:
    • 进行视觉质量评估
    • 拟合是否准确描述了曲线的行为,或者拟合线是否穿过传感图?
    • 拟合是否恰当地描述了数据的曲率?
    • 是 amp是否与参考数据一致?

scIC自动化数据分析

  • scIC 自动分析只需点击几下即可将原始数据处理为质量控制图和拟合数据。
    1. 双击实验列表中选定的实验,打开 scIC 实验
    2. 单击实验选项卡底部的蓝色大分析按钮。
    3. 从实验工作流程中,选择您想要分析的分析。
    4. 从可用的分析类型中选择 Kinetics scIC,然后单击下一步。
      • 笔记: 如果实验仍在进行中,列表中仅显示已完成的检测。选择检测后,下一个窗口将显示与所用方法/检测相关的所有可用分析类型。
    5. 如有需要,请在以下窗口中配置分析。默认拟合模型为“动力学 - 自由终止水平”,并勾选“强制终止水平拟合为零”复选框。仅当生物学或数据需要更复杂的描述时,才可偏离此模型。
    6. 配置完成后,单击“分析”即可查看所有派生的快照、原始和处理的传感器图以及动力学值。
  • 由于 s 固有的复杂性amp用于 scIC 检测的 les,产生的传感图可能会有不规则性。
  • 为了解决这个问题,自动分析强调图像和传感器图的质量控制。
  • 如果需要手动校正或更深入的分析,则手动分析 Scratchpad 中提供了用于工件校正的工具。

heliXcyto 维护和净化

  • heliXcyto 的维护对于确保仪器的最佳性能和使用寿命至关重要。定期保养包括清洁程序,以防止污染并保持系统完整性,从而确保获得准确的结果和平稳运行。持续的维护对于仪器的可靠性和实验结果的质量至关重要。
    heliXcyto 维护包括两个关键程序:Cyto System Wash(可直接集成到分析工作流程中)和 Clean & Sleep(作为单独的例程执行,用于在之前较长的过夜测量之后或超过 2 天不使用后在使用前维护仪器)。
  • 系统清洗和清洁与睡眠都需要芯片托盘中存在 heliX® 维护芯片。

清洁和睡眠习惯

  • 清洁和睡眠程序用于清洁和设备关机/存放。该方法首先用超纯水冲洗 heliX® 设备的流体管,然后用 70% 乙醇冲洗。最后,将所有管路中的空气排空。
  • 此清洁过程完全自动化,大约需要 40 分钟。清洁过程中,乙醇会被喷射到水瓶中,因此清洁后应将瓶中的液体丢弃。
  • 清洁并休眠后,仪器将进入休眠模式,直到执行唤醒并启动后才能使用。两次运行都需要 heliX® 维护芯片。
  • 重要的: 为防止管道污染,清洁过程后请务必丢弃水瓶中的内容物(水/乙醇混合物)并清空废物容器。

关机和长期储存

  • 如果长时间不使用,请在清洁和睡眠程序后从缓冲液托盘中取出装有水和乙醇的瓶子,并将管子暴露在空气中。
  • 取出 heliX® 维护芯片,并将其存放在原包装袋中。这可以防止回流和污染。关闭设备电源。

细胞系统清洗

  • heliXcyto System Wash 使用清洁溶液 3 (CS3) 在约 45 分钟内彻底清洁微流体系统。CS3 可在两秒内被吸收tages. 第一针和 sample 环被填充并孵育以去除任何污染物。
  • 笔记: 在使用设备时,至少每天进行一次细胞系统清洗。我们建议在每次检测后(例如更换新的细胞系或进行其他实验时)将细胞系统清洗方法添加到检测工作流程中。amp(如果质量不佳)或检测工作流程已结束。最多 50 次细胞系统清洗后,更换维护芯片,芯片托盘中的再生计数显示 view 设备控制。

接触

  • 动态生物传感器有限公司
  • 佩希廷格街8/10
  • 81379 慕尼黑
  • 德国
  • 布鲁克科学有限责任公司
  • 曼宁公园曼宁路40号
  • 马萨诸塞州比尔里卡 01821

美国

常问问题

scIC 常见问题解答

我可以重复使用 heliXcyto 芯片吗?

是的,heliXcyto 芯片可重复使用,也可一次性使用。请遵循正确的清洁和储存指南。

维护芯片的用途是什么?

维护芯片用于清洁、测试和维护操作,以确保系统正常运行。

我应该多久清洁一次设备?

heliXcyto 的流体系统采用 Cyto System Wash 和 Clean&Sleep 方法保持清洁。建议在每次检测后(尤其是在更换细胞类型时)或在检测工作流程结束后,使用维护芯片上的 Cyto System Wash 清洁微流体系统。Clean&Sleep 程序应在上一次长时间测量后(例如,在过夜实验后的早晨)使用前执行,或当 heliXcyto 停机超过 2 天不使用时执行。

溶液:RB 1 /水/ CS 1 / CS 3 /标准化溶液可以在设备中保存多长时间?

通常,每次测量前,应检查所有溶液的剩余量以及是否存在潜在的浑浊度或沉淀。如果出现这种情况,应立即更换溶液。水和RB 1应每天更换,且每次测量前应过滤RB 1。稀释的标准化溶液可连续使用2天。清洁溶液可稳定保存约3天。

我可以使用 heliXcyto 芯片多长时间?

您可以在 heliiOS 设备版块的芯片托盘选项卡中查看 heliXcyto 芯片的有效期。过期后,芯片的完整性将不予保证。然而,只要阱保持稳定、表面清洁,且荧光背景低于芯片测试中指示的截止值,则该芯片仍可用于测量。建议在芯片使用后定期进行外部芯片清洁(使用芯片清洁套件 CCK-1-1),以显著延长芯片使用寿命。

维护芯片可以使用多长时间?

系统清洗 50 次后需要更换维护芯片(在 heliOS 的设备控制的芯片托盘选项卡中算作再生)。

heliXcyto 芯片测试应该多久进行一次?

芯片测试会在开始新实验前收集芯片的荧光背景、清洁度和完整性信息。使用新芯片时至少应进行一次芯片测试,但建议在每次实验开始前或开始时进行,以检查芯片状态。这样可以调整测量条件,并将传感图中的异常追溯到芯片或设备。

分析物标记化学是什么?

我们的标记试剂盒分别通过 NHS 酯将红色或绿色荧光染料偶联到蛋白质分析物中的伯胺(例如赖氨酸或 N 端)。详细信息和故障排除部分请参阅我们的 heliXcyto 标记试剂盒红色染料(标记试剂盒红色染料 2 CY-LK-R2-1)和 heliXcyto 标记试剂盒绿色染料(标记试剂盒绿色染料 CY-LK-G1-1)手册。 web店铺。

在哪里可以找到 heliOS 凭证和许可证信息?

输入凭证和许可证信息的过程在我们的 heliXcyto 指南的 heliiOS 安装部分中有描述。 web网站(heliXcyto 指南)。您的许可证信息应保存在 heliXcyto PC 桌面上的 scIC 文件夹中,该文件夹由我们的应用专家在培训期间创建。

heliXcyto 的激发/发射范围是多少?

红光激发波长为605-625 nm,发射波长(检测波长)为655-685 nm。绿光激发波长为490-510 nm,发射波长为525-575 nm。

为了保证统计可靠性,我需要对同一个实验进行多少次测量?

为了获得可靠的平均动力学速率,建议在均质细胞群中进行3-4次3浓度动力学测量。在一致的数据集中,重复实验的结合和解离速率应在2-4倍的窗口内。

scIC 测量的灵敏度是多少?

靶标表达的最低检测限取决于分析物的标记,但通常scIC已经可以测量每个细胞中少至1000-10000个分子的动力学。为了提高灵敏度,建议捕获至少5个细胞,并平衡5-10个分析物的DOL和LED功率,以实现最大荧光计数。

就动力学速率而言,heliXcyto 的检测限是多少?

请参阅 heliXcyto 技术规格,了解最新的技术限制,这些限制可在 heliXcyto 指南(heliXcyto 指南)中找到。解离常数 Kd:10 pM 至 1 mM 结合速率常数 kon:1E3 至 1E7 M-1s-1 解离速率常数 koff:1E-6 至 1 s-1 有关详细信息,请查看我们 heliXcyto 指南。 web地点。

文件/资源

dynamic BIOSENSORS heliX cyto 全自动实验室分析系统 [pdf] 用户手册
heliX cyto 全自动实验室分析系统,heliX cyto,全自动实验室分析系统,自动化实验室分析系统,实验室分析系统,分析系统,系统

参考

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