dynamic BIOSENSORS heliXcyto 标准化解决方案

dynamic BIOSENSORS heliXcyto 标准化解决方案

主要特点

  • 用于标准化 heliX cyto 芯片的 Spot 1 和 Spot 2 上的荧光信号
  • 能够在 RT-IC 测量期间正确实时参考红色或绿色荧光信号
  • 与所有 heliX cyto 芯片兼容
  • 标准化溶液-Ra 带有中等亲水性的红色染料,带有单个正净电荷
  • 标准化溶液-Ga 携带亲水性绿色染料,带有单个负净电荷

产品描述

订单号: 或非-0

表 1。内容和存储信息

材料 专注 数量 贮存
归一化溶液-Ra 橙子 10 微米 3x 100 µL -20 摄氏度
归一化溶液-Ga 绿色的 10 微米 3x 100 µL -20 摄氏度

仅供研究使用。

本产品的保质期有限,请参阅标签上的有效期。

准备

选择与分析物标签颜色相对应的标准化溶液颜色(Ga 或 Ra)。用运行缓冲液将 10 µM 标准化储备溶液稀释至工作浓度。

实验所需的最终体积可以在 heliOS s 中找到ampLe Tray view 的测定。

标准化溶液的浓度应大致对应于待测最高分析物浓度中的荧光团浓度。这可以使用以下等式计算:
数学公式

数学公式 :所需颜色的标准化溶液的浓度
数学公式 :标记分析物溶液中染料的浓度
数学公式 :应测量的分析物的最高浓度
数学公式 :标记程度(染料与分析物的比率)

稀释后的溶液可在 2-8°C 下保存长达 7 天。

重要的: 不要将标准化溶液-Ra和标准化溶液-Ga混合在一起,除非您正在设置双色测量(绿色和红色通道的并行读数)。

应用说明

在 RT-IC 测量中,标准化溶液的荧光信号应处于 类似范围 作为来自结合分析物(原始数据)的最高信号。

绝对荧光信号取决于标准化溶液浓度和测量中施加的激发功率。激发功率必须根据以下参数选择:

a.分析物溶液中的荧光团浓度:
荧光团浓度取决于测量中使用的分析物浓度以及分析物的标记程度。对于高 DOL 和高分析物浓度,可能需要降低激发功率。

b. 预期结合信号:
细胞上高表达的靶标可以结合更多的标记分析物分子。如果靶标高度过表达,则可以预期会产生强烈的结合信号。为了避免快门关闭,可以考虑降低激发功率。

c. 芯片类型:
不同类型的芯片具有不同的荧光背景。芯片上的陷阱越大、陷阱越多,背景信号就越高。因此,L5 芯片所需的激发功率可能比 M5 芯片低。

用于激励功率和规范的起点。 RT-IC实验中使用的溶液浓度,请参见表2。

桌子 2. 适用于 heliX cyto M5 芯片的荧光团浓度、标准化溶液浓度和激发功率的关系

分析物染料浓度 = 分析物浓度 x DOL 励磁功率 浓度标准化溶液 稀释标准化溶液
25 纳米 0.5 25 纳米 1:400
50 纳米 0.3 50 纳米 1:200
100 纳米 0.2 100 纳米 1:100
300 纳米 0.1 300 纳米 1:33
500 纳米 0.08 500 纳米 1:20
1 微米 0.05 1 微米 1:10
2.5 微米 0.02 2.5 微米 1:4

笔记: 此表仅供参考。但是,heliX cyto 中记录的最终信号取决于许多因素。因此,每个系统都需要进行一些优化。

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文件/资源

dynamic BIOSENSORS heliXcyto 标准化解决方案 [pdf] 用户手册
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参考

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